{"id":42149,"date":"2022-11-02T17:55:38","date_gmt":"2022-11-02T16:55:38","guid":{"rendered":"https:\/\/iul-instruments.com\/?p=42149"},"modified":"2022-11-14T09:50:17","modified_gmt":"2022-11-14T08:50:17","slug":"serielle-verduennung-der-albtraum-jedes-mikrobiologen","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/iul-instruments.com\/de\/serielle-verduennung-der-albtraum-jedes-mikrobiologen\/","title":{"rendered":"Serielle Verd\u00fcnnung \u2013 Der Albtraum jedes Mikrobiologen"},"content":{"rendered":"<p>[et_pb_section fb_built=&#8220;1&#8243; admin_label=&#8220;section&#8220; _builder_version=&#8220;4.16&#8243; global_colors_info=&#8220;{}&#8220;][et_pb_row admin_label=&#8220;row&#8220; _builder_version=&#8220;4.16&#8243; background_size=&#8220;initial&#8220; background_position=&#8220;top_left&#8220; background_repeat=&#8220;repeat&#8220; global_colors_info=&#8220;{}&#8220; custom_margin=&#8220;-61px|auto||auto||&#8220;][et_pb_column type=&#8220;4_4&#8243; _builder_version=&#8220;4.16&#8243; custom_padding=&#8220;|||&#8220; global_colors_info=&#8220;{}&#8220; custom_padding__hover=&#8220;|||&#8220;][et_pb_text admin_label=&#8220;Text&#8220; _builder_version=&#8220;4.16&#8243; background_size=&#8220;initial&#8220; background_position=&#8220;top_left&#8220; background_repeat=&#8220;repeat&#8220; global_colors_info=&#8220;{}&#8220;]<\/p>\n<p><strong>Derzeit gibt es\u00a0<\/strong><a href=\"https:\/\/iul-instruments.com\/iul-micro\/\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\"><strong>verschiedene Ausplattierungstechniken<\/strong><\/a><strong>, wobei jede \u00fcber spezifische Anwendungen und Eigenschaften verf\u00fcgt. Au\u00dferdem sind sie mit gewissen Vorbereitungsschritten, wie beispielsweise einer seriellen Verd\u00fcnnung (Verd\u00fcnnungsreihe), verbunden.<\/strong> Aber, auch wenn es unterschiedliche Wege des Ausplattierens oder der Kultivierung von Mikroorganismen gibt, werden die folgenden 4 Methoden am h\u00e4ufigsten angewendet: Das Oberfl\u00e4chen-(Ausstrich-)verfahren, das Plattengussverfahren, das Tropfplattenverfahren und die Spiralplattierung.<\/p>\n<p>IUL entwickelt, produziert und vermarktet klassische Mikrobiologieger\u00e4te sowie Verbrauchsmaterialien, die beispielweise im Zusammenhang mit den in diesem Blog erw\u00e4hnten Methoden zur Anwendung kommen.\u00a0<strong>IUL bietet ultimative Technologie, mit Labor-L\u00f6sungen, unter anderem, f\u00fcr die Probenvorbereitung, die serielle Verd\u00fcnnung, das Ausplattieren oder die Koloniez\u00e4hlung.<\/strong><\/p>\n<p><img decoding=\"async\" class=\"aligncenter size-large wp-image-42150\" src=\"https:\/\/iul-instruments.com\/wp-content\/uploads\/2022\/11\/Imagen2DE-786x1024.png\" alt=\"\" width=\"786\" height=\"1024\" \/><\/p>\n<h2><strong>Oberfl\u00e4chen-(Ausstrich-)verfahren<\/strong><\/h2>\n<p><strong>Bei diesem Verfahren wird mit einem sterilen, abgewinkelten (L-f\u00f6rmigen) Glas- oder Metallstab (Impfhaken\/Drigalski-Spatel) <\/strong>mit einer glatten Oberfl\u00e4che eine kleine Menge Mikroorganismen-(Proben-)suspension auf der Agarplatte gleichm\u00e4\u00dfig ausgestrichen, sodass die Kolonien einfach gez\u00e4hlt und isoliert werden k\u00f6nnen.<\/p>\n<p><strong>Gem\u00e4\u00df Kapitel 3 des bakteriologisch-analytischen Handbuchs der US-amerikanischen Zulassungsbeh\u00f6rde FDA (<\/strong><a href=\"https:\/\/www.fda.gov\/food\/laboratory-methods-food\/bam-chapter-3-aerobic-plate-count\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\"><strong>FDA BAM, Chapter 3<\/strong><\/a><strong>)\u00a0liegt der geeignete Bestimmungsbereich bei der Koloniez\u00e4hlung bei 25\u2013250 koloniebildenden Einheiten (KBE) pro Platte.<\/strong>\u00a0Platten mit mehr als 250 KBE gelten als zu dicht besiedelt (f\u00fcr die Koloniez\u00e4hlung) oder k\u00f6nnten das Wachstum gewisser Bakterien unterdr\u00fccken. Andererseits sind 25 KBE pro Platte nicht ausreichend, um als statistisch repr\u00e4sentativ f\u00fcr die analysierte Probe zu gelten.<\/p>\n<p>Entsprechend ist, um mit dem Oberfl\u00e4chen-(Ausstrich-)verfahren optimale Ergebnisse zu erzielen, vor der Beimpfung der Platte mit der Probe eine serielle Verd\u00fcnnung notwendig, und es m\u00fcssen mindestens 3 Platten beimpft werden. Bei diesem Verfahren wird die Probe \u00fcber mehrere Verd\u00fcnnungsschritte mit einem Standardvolumen des sterilen Verd\u00fcnnungsmittels verd\u00fcnnt.\u00a0<strong>Das Verd\u00fcnnen der Probe erm\u00f6glicht das Ausplattieren verschiedener Probenkonzentrationen, um nach der Inkubation eine leicht ausz\u00e4hlbare Platte zu erhalten<\/strong>\u00a0und die Keimzahlbestimmung der Probe vorzunehmen.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h2><strong>Plattengussverfahren<\/strong><\/h2>\n<p><strong>Das Plattengussverfahren ist eine Methode der Wahl zur Bestimmung der koloniebildenden Einheiten fl\u00fcssiger Proben.\u00a0<\/strong>Bei dieser Methode wird mit einer sterilen Pipette ein bestimmtes Volumen einer Mikroorganismen-(Proben-)suspension (circa 1 ml) in die Mitte einer sterilen Petrischale pipettiert. Dann wird der fl\u00fcssige, abgek\u00fchlte Agar \u00fcber die in der Petrischale vorgelegte Probensuspension ausgegossen und gut mit der Probe vermischt.\u00a0 Nach dem Erstarren des Agars wird die Petrischale verschlossen, umgedreht (\u201eauf den Kopf gestellt\u201c) und wie gewohnt inkubiert.<\/p>\n<p><strong>Genauso wie das Oberfl\u00e4chen-(Ausstrich-)verfahren erfordert auch diese Methode eine Probenvorbereitung<\/strong>, also serielle Verd\u00fcnnungen der Probe, um eine f\u00fcr die Koloniez\u00e4hlung optimale Anzahl an Kolonien zu erhalten.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h2><strong>Tropfplattenverfahren<\/strong><\/h2>\n<p>Das Tropfplattenverfahren eignet sich zur Durchf\u00fchrung der Bestimmung lebensf\u00e4higer Mikroorganismen (Keimzahlbestimmung) eines bekannten Volumens in einem Becherglas. Das Tropfplattenverfahren hat viele positive Eigenschaften:<strong> Ausplattieren und Z\u00e4hlen der Kolonien sind weniger arbeitsaufwendig als bei alternativen Methoden und gleichzeitig sehr praktisch und einfach in der Handhabung.<\/strong> Zudem ist das Dispensieren von Tropfen auf eine Agarplatte gegen\u00fcber dem Ausstreichen eines vergleichbaren Gesamtprobenvolumens auf einer Agarplatte mit geringerem Zeit- und Arbeitsaufwand verbunden.<\/p>\n<p>Mit dem Ausplattieren der zu analysierenden Probe in Tropfen erm\u00f6glicht diese Methode eine schnellere und vielleicht sogar genauere Koloniez\u00e4hlung. Au\u00dferdem k\u00f6nnen<strong>\u00a0die Tropfen von ordnungsgem\u00e4\u00df getrockneten Agarplatten schnell aufgenommen werden.<\/strong>\u00a0Abgesehen davon wird beim Tropfplattenverfahren relativ wenig Material verbraucht. Das Verfahren geh\u00f6rt jedoch trotz seiner weitverbreiteten Anwendung noch nicht zu den standardisierten Methoden.<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<h2><strong>Spiralplattierung zur seriellen Verd\u00fcnnung<\/strong><\/h2>\n<p>Bei der <a href=\"https:\/\/iul-instruments.com\/rapid-plating-iul-spiral-plate-method\/\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\"><strong>Spiralplattierung<\/strong><\/a><strong>\u00a0handelt es sich um eine 2-in-1-Methode: Gleichzeitiges Verd\u00fcnnen und Ausplattieren. Damit ist sie eine der zeitsparendsten und abfallminimierendsten Beimpfungsmethoden<\/strong>, was mit einer Kostenersparnis einhergeht. Deshalb verwenden immer mehr Mikrobiologielabors zur <a href=\"https:\/\/www.fda.gov\/food\/laboratory-methods-food\/bam-chapter-3-aerobic-plate-count#conventional\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">Keimzahlbestimmung<\/a> einen Spiralplater.<\/p>\n<p>Das hei\u00dft: Schnelles Ausplattieren, indem eine rotierende Agarplatte mit einem bekannten Volumen einer fl\u00fcssigen Probe beimpft wird. Dabei bewegt sich die Dosierspritze vom Zentrum ausgehend Richtung Peripherie der rotierenden Platte, w\u00e4hrend das applizierte Probenvolumen verringert wird, was zu einer Ausplattierung entsprechend einer archimedischen Spirale f\u00fchrt. Infolgedessen<strong>\u00a0werden <\/strong>\u2013<strong> im Gegensatz zum manuellen Ausplattieren <\/strong>\u2013<strong> auf einer Platte verschiedene Konzentrationen\/Probenverd\u00fcnnungen ausplattiert, was auch bei der Koloniez\u00e4hlung zu einer Zeitersparnis f\u00fchrt.<\/strong>\u00a0Es sind keine seriellen Verd\u00fcnnungen erforderlich!<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<p>[\/et_pb_text][\/et_pb_column][\/et_pb_row][et_pb_row _builder_version=&#8220;4.18.0&#8243; _module_preset=&#8220;default&#8220; global_colors_info=&#8220;{}&#8220;][et_pb_column type=&#8220;4_4&#8243; _builder_version=&#8220;4.18.0&#8243; _module_preset=&#8220;default&#8220; global_colors_info=&#8220;{}&#8220;][et_pb_button button_url=&#8220;https:\/\/iul-instruments.com\/de\/produkt\/eddy-jet-2w-spiral-plater\/&#8220; url_new_window=&#8220;on&#8220; button_text=&#8220;M\u00f6chten Sie mehr \u00fcber die IUL-Spiralplatten erfahren?&#8220; _builder_version=&#8220;4.18.0&#8243; _module_preset=&#8220;default&#8220; hover_enabled=&#8220;0&#8243; global_colors_info=&#8220;{}&#8220; sticky_enabled=&#8220;0&#8243;][\/et_pb_button][\/et_pb_column][\/et_pb_row][\/et_pb_section]<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Derzeit gibt es\u00a0verschiedene Ausplattierungstechniken, wobei jede \u00fcber spezifische Anwendungen und Eigenschaften verf\u00fcgt. 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Au\u00dferdem sind sie mit gewissen Vorbereitungsschritten, wie beispielsweise einer seriellen Verd\u00fcnnung (Verd\u00fcnnungsreihe), verbunden.<\/strong> Aber, auch wenn es unterschiedliche Wege des Ausplattierens oder der Kultivierung von Mikroorganismen gibt, werden die folgenden 4 Methoden am h\u00e4ufigsten angewendet: Das Oberfl\u00e4chen-(Ausstrich-)verfahren, das Plattengussverfahren, das Tropfplattenverfahren und die Spiralplattierung.\r\n\r\nIUL entwickelt, produziert und vermarktet klassische Mikrobiologieger\u00e4te sowie Verbrauchsmaterialien, die beispielweise im Zusammenhang mit den in diesem Blog erw\u00e4hnten Methoden zur Anwendung kommen.\u00a0<strong>IUL bietet ultimative Technologie, mit Labor-L\u00f6sungen, unter anderem, f\u00fcr die Probenvorbereitung, die serielle Verd\u00fcnnung, das Ausplattieren oder die Koloniez\u00e4hlung.<\/strong>\r\n\r\n<img class=\"aligncenter size-large wp-image-42150\" src=\"https:\/\/iul-instruments.com\/wp-content\/uploads\/2022\/11\/Imagen2DE-786x1024.png\" alt=\"\" width=\"786\" height=\"1024\" \/>\r\n<h2><strong>Oberfl\u00e4chen-(Ausstrich-)verfahren<\/strong><\/h2>\r\n<strong>Bei diesem Verfahren wird mit einem sterilen, abgewinkelten (L-f\u00f6rmigen) Glas- oder Metallstab (Impfhaken\/Drigalski-Spatel) <\/strong>mit einer glatten Oberfl\u00e4che eine kleine Menge Mikroorganismen-(Proben-)suspension auf der Agarplatte gleichm\u00e4\u00dfig ausgestrichen, sodass die Kolonien einfach gez\u00e4hlt und isoliert werden k\u00f6nnen.\r\n\r\n<strong>Gem\u00e4\u00df Kapitel 3 des bakteriologisch-analytischen Handbuchs der US-amerikanischen Zulassungsbeh\u00f6rde FDA (<\/strong><a href=\"https:\/\/www.fda.gov\/food\/laboratory-methods-food\/bam-chapter-3-aerobic-plate-count\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\"><strong>FDA BAM, Chapter 3<\/strong><\/a><strong>)\u00a0liegt der geeignete Bestimmungsbereich bei der Koloniez\u00e4hlung bei 25\u2013250 koloniebildenden Einheiten (KBE) pro Platte.<\/strong>\u00a0Platten mit mehr als 250 KBE gelten als zu dicht besiedelt (f\u00fcr die Koloniez\u00e4hlung) oder k\u00f6nnten das Wachstum gewisser Bakterien unterdr\u00fccken. Andererseits sind 25 KBE pro Platte nicht ausreichend, um als statistisch repr\u00e4sentativ f\u00fcr die analysierte Probe zu gelten.\r\n\r\nEntsprechend ist, um mit dem Oberfl\u00e4chen-(Ausstrich-)verfahren optimale Ergebnisse zu erzielen, vor der Beimpfung der Platte mit der Probe eine serielle Verd\u00fcnnung notwendig, und es m\u00fcssen mindestens 3 Platten beimpft werden. Bei diesem Verfahren wird die Probe \u00fcber mehrere Verd\u00fcnnungsschritte mit einem Standardvolumen des sterilen Verd\u00fcnnungsmittels verd\u00fcnnt.\u00a0<strong>Das Verd\u00fcnnen der Probe erm\u00f6glicht das Ausplattieren verschiedener Probenkonzentrationen, um nach der Inkubation eine leicht ausz\u00e4hlbare Platte zu erhalten<\/strong>\u00a0und die Keimzahlbestimmung der Probe vorzunehmen.\r\n<h2><strong>Plattengussverfahren<\/strong><\/h2>\r\n<strong>Das Plattengussverfahren ist eine Methode der Wahl zur Bestimmung der koloniebildenden Einheiten fl\u00fcssiger Proben.\u00a0<\/strong>Bei dieser Methode wird mit einer sterilen Pipette ein bestimmtes Volumen einer Mikroorganismen-(Proben-)suspension (circa 1 ml) in die Mitte einer sterilen Petrischale pipettiert. Dann wird der fl\u00fcssige, abgek\u00fchlte Agar \u00fcber die in der Petrischale vorgelegte Probensuspension ausgegossen und gut mit der Probe vermischt.\u00a0 Nach dem Erstarren des Agars wird die Petrischale verschlossen, umgedreht (\u201eauf den Kopf gestellt\u201c) und wie gewohnt inkubiert.\r\n\r\n<strong>Genauso wie das Oberfl\u00e4chen-(Ausstrich-)verfahren erfordert auch diese Methode eine Probenvorbereitung<\/strong>, also serielle Verd\u00fcnnungen der Probe, um eine f\u00fcr die Koloniez\u00e4hlung optimale Anzahl an Kolonien zu erhalten.\r\n<h2><strong>Tropfplattenverfahren<\/strong><\/h2>\r\nDas Tropfplattenverfahren eignet sich zur Durchf\u00fchrung der Bestimmung lebensf\u00e4higer Mikroorganismen (Keimzahlbestimmung) eines bekannten Volumens in einem Becherglas. Das Tropfplattenverfahren hat viele positive Eigenschaften:<strong> Ausplattieren und Z\u00e4hlen der Kolonien sind weniger arbeitsaufwendig als bei alternativen Methoden und gleichzeitig sehr praktisch und einfach in der Handhabung.<\/strong> Zudem ist das Dispensieren von Tropfen auf eine Agarplatte gegen\u00fcber dem Ausstreichen eines vergleichbaren Gesamtprobenvolumens auf einer Agarplatte mit geringerem Zeit- und Arbeitsaufwand verbunden.\r\n\r\nMit dem Ausplattieren der zu analysierenden Probe in Tropfen erm\u00f6glicht diese Methode eine schnellere und vielleicht sogar genauere Koloniez\u00e4hlung. Au\u00dferdem k\u00f6nnen<strong>\u00a0die Tropfen von ordnungsgem\u00e4\u00df getrockneten Agarplatten schnell aufgenommen werden.<\/strong>\u00a0Abgesehen davon wird beim Tropfplattenverfahren relativ wenig Material verbraucht. Das Verfahren geh\u00f6rt jedoch trotz seiner weitverbreiteten Anwendung noch nicht zu den standardisierten Methoden.\r\n<h2><strong>Spiralplattierung zur seriellen Verd\u00fcnnung<\/strong><\/h2>\r\nBei der <a href=\"https:\/\/iul-instruments.com\/rapid-plating-iul-spiral-plate-method\/\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\"><strong>Spiralplattierung<\/strong><\/a><strong>\u00a0handelt es sich um eine 2-in-1-Methode: Gleichzeitiges Verd\u00fcnnen und Ausplattieren. Damit ist sie eine der zeitsparendsten und abfallminimierendsten Beimpfungsmethoden<\/strong>, was mit einer Kostenersparnis einhergeht. Deshalb verwenden immer mehr Mikrobiologielabors zur <a href=\"https:\/\/www.fda.gov\/food\/laboratory-methods-food\/bam-chapter-3-aerobic-plate-count#conventional\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">Keimzahlbestimmung<\/a> einen Spiralplater.\r\n\r\nDas hei\u00dft: Schnelles Ausplattieren, indem eine rotierende Agarplatte mit einem bekannten Volumen einer fl\u00fcssigen Probe beimpft wird. Dabei bewegt sich die Dosierspritze vom Zentrum ausgehend Richtung Peripherie der rotierenden Platte, w\u00e4hrend das applizierte Probenvolumen verringert wird, was zu einer Ausplattierung entsprechend einer archimedischen Spirale f\u00fchrt. 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